腺嘌呤诱导慢性肾病大鼠模型肾纤维化过程中铁死亡相关因子的变化
2023.08.15目的 观察腺嘌呤诱导慢性肾病大鼠模型肾铁死亡相关因子的变化并探讨铁死亡参与慢性肾病进 展的机制。
方法 20 只大鼠随机分为对照组(Con)和模型组(CKD),CKD 组予以 2. 5%腺嘌呤灌胃诱导,所有大鼠 于 6 周末处死。 留取大鼠血样检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr);HE 染色观察肾病理改变;Masson 染色观察肾小 管间质纤维化情况;检测肾组织铁含量、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;免疫组化染色观察过氧化物酶 4 (GPX4)以及 4-羟基壬烯醛(4-HNE)蛋白的表达;Western blot 法检测铁死亡相关蛋白胱氨酸转运蛋白系统 X c-亚 基 SLC7A11、过氧化物酶 4(GPX4)以及铁代谢相关蛋白转铁蛋白受体 1(TFR-1)、铁蛋白重链(FTH)、铁蛋白轻链 (FTL)、膜铁转运蛋白(FPN)的蛋白表达情况。 分析铁含量、MDA 含量、GSH 水平与肾间质纤维化的相关性。
结果 与 Con 组相比,CKD 组大鼠血清 BUN、Scr 均明显增加(P<0. 05),HE 染色和 Masson 染色见明显肾小管扩张及间质 纤维化;铁含量以及 MDA 含量明显升高(P<0. 05),GSH 含量明显降低(P<0. 05);免疫组化显示,与 Con 组相比, CKD 组 4-HNE 蛋白表达明显增加,GPX4 蛋白表达明显减少。 Western blot 结果显示,与 Con 组相比,CKD 组的 SLC7A11、GPX4、TFR-1、FPN 蛋白表达明显减少,而 FTH、FTL 蛋白表达明显增加。 相关性分析提示铁含量、MDA 含量与肾纤维化相对面积(%)呈正相关、GSH 含量与肾纤维化相对面积(%)呈负相关。
结论 在腺嘌呤诱导的 CKD 大鼠模型中存在铁死亡,并可能通过 GSH-GPX4 轴参与 CKD 肾纤维化进展。
